안녕하세요 바이러스를 생산하는 기업이나 실험실에서 사용할 수 있는 TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose) 실험법을 정리해서 올려보겠습니다 저는 AAV를 생산하는 기업의 연구소에서 일하고 있는데 주 업무가 바이러스 생산과 바이러스 정량을 하는 일이기 때문에 TCID50 실험을 자주합니다 밑에 정리한 SOP 입니다 1. Plate cells1.1 96well에 50 ul씩 seeding (8x105 cells/ml) 한다- 7ml cell suspension1.2 Incubator에서 o/n 배양한다2. Virus infection2.1 H5 virus를 SFM에 3.2x108 particles/ml 희석하여 dilution (15ml)을 만든다 2.2 정량할 바이러스 dil..

안녕하세요 세포 만지는 연구원 맘쿵맘입니다 이번에는 hela cell 의 아류종인 RC32 cell 을 배양하고 유지하는 방법에 대해 알아보겠습니다일단 현미경으로 세포가 얼마나 디쉬에 차있는지 확인을 하세요 70-80% 정도 일 때 계대를 하는 것이 좋습니다1. 세포 배양액을 suction하여 제거합니다2. DPBS (1x) 10ml 씩 넣고 워싱해줍니다 두번 해주세요 3. 워싱한 DPBS를 제거한 후 trypsin EDTA(0.25%) 을 1ml 분주하여 전반적으로 세포에 묻게해주세요4. 37도 cell incubator에서 3분간 배양해주세요5. DMEM complete media 5ml 씩 넣고 Pipet으로 세포를 잘 모아주세요6. Conical tube 에 모은 세포를 1500rpm, 5분간 원..